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體外轉錄服務

服務簡介

基因的體外轉錄是20世紀70年代發展起來的一項分子生物學和細胞生物學實驗技術。體外轉錄是以DNA為模板,在無細胞係中在一係列轉錄因子的作用下經RNA聚合酶合成RNA的過程。轉錄合成的RNA可用於RNA結構和功能研究、RNA酶保護、探針雜交、RNAi、顯微注射以及體外翻譯等多方麵的下遊應用。

技術支持

電話:021-57072092
Email: service6@sangon.com

體外轉錄的mRNA在5端加上帽子、3端加上polyA尾會更加穩定,使其具有編碼蛋白質的功能,可以應用到疾病治療、疫苗等領域;體外轉錄的RNA加上地高辛或者生物素等標記就可以作為多項實驗的探針,例如:RNA原位雜交、Northern Blot、RNA Pull down等;大量體外轉錄的無修飾RNA也可以用於製備RNA標準品,合成tRNA、rRNA或者其他小的功能性RNA或者RNA病毒基因組、核酶等。

帶有T7啟動子線性化的質粒、PCR產物或者合成的DNA片段都可以作為體外轉錄模板,模板可用TE緩衝液或RNase-free H2O溶解,推薦濃度0.5 μg/ul。

注:以T7作為體外轉錄啟動子時,在正向引物5‘端添加一個帽子G,有利於提高體外轉錄RNA分子的侵染活性,在靶位序列前連續帶有3個G,轉錄效率較高。

訂購信息

服務項目 服務內容 周期
轉錄模板合成 合成或擴增DNA序列 2-4周
模板處理 質粒線性化並在序列上添加T7啟動子 1-3天
體外轉錄 將DNA序列轉錄為RNA 序列 1-2周
RNA純化和質檢 檢測RNA濃度和質量 1-3天

客戶提供

提供樣本

可以選擇性地提供含目的序列的質粒、PCR產物或者DNA片段或者其他樣本。

提供信息

《必威betway官方网站登录 體外轉錄服務訂購表》
其他實驗必須的相關資料。

最終交付

交付成品

轉錄的RNA產物(一般轉錄一次不少於80 μg RNA)

交付報告

實驗報告(實驗步驟和RNA質檢結果)

案例

M
1

體外轉錄RNA:瓊脂糖凝膠電泳檢測結果

M:Marker;1:體外轉錄RNA

體外轉錄RNA:分光光度計檢測結果

No. Sample ID ID# Sample Type SW (nm) SW Abs 260 Abs
(10 mm)
280 Abs
(10 mm)
260/280 260/230 Conc. (ng/ul)
1 My Sample 1 RNA 260 0.01 0.01 0.032 0.31 0.44 0.39
2 My Sample 2 RNA 260 19.362 19.362 10.398 1.87 1.64 774.49
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