引物純化方式選擇
選擇純化方式
必威betway官方网站登录 提供業內較全麵的純化方式，包括5項常規純化方式和3項加強純化方式。大部分的情況下，使用常規純化方式已能滿足絕大部分客戶的定製需求。
| 常規純化方式 | |
|---|---|
| 純化方式 | 簡介 |
| HAP HAP高效親和吸附 |
即通過HAP樹脂純化柱進行純化，和OPC比，負載量更大，且可避免一些短片段帶入，提升了速度和純度。HAP的推出，成為了大幅降低當時國內DNA價格門檻的裏程碑。 |
| PAGE 聚丙烯酰胺凝膠電泳 |
生工在經典的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳基礎上進行工藝流程優化，大幅提高純化速度，對DNA片段進行分離，再回收目的DNA。 |
| ULTRAPAGE 增強聚丙烯酰胺凝膠電泳 |
生工獨有，分辨率高於PAGE，避免了人員切膠時回收到差別僅一個或幾個堿基的引物，配合質譜檢測，引物純度和準確性均能得到提升 |
| HPLC 高效液相色譜 |
根據高效液相色譜的原理，依據DNA的疏水性分離純化到正確的產物 |
| HPLC_CE (IVD) 體外診斷優化高效液相色譜 |
針對IVD應用優化，在毛細管電泳（CE）檢測保證純度的基礎上，對HPLC純化柱進行特殊去除殘留工藝，盡可能避免交叉汙染 |
| 增強純化方式 | |
| 純化方式 | 簡介 |
| IE-HPLC 離子交換HPLC |
離子交換（IE）HPLC基於相對電荷差將全長引物從截短的引物中分離純化出來，可以有效去除N-1短片段。適合大多數的修飾，但不適合硫代、巰基等修飾。 |
| 2X HPLC 雙重HPLC純化 |
對於純度要求高的引物，我們可提供雙重HPLC純化（先反相，後離子交換），尤其適合長度高於59個堿基且帶有修飾的引物 |
| PAGE+HPLC PAGE+HPLC雙重純化 |
對於純度要求高的引物，我們可提供PAGE+HPLC雙重純化，即在一次PAGE純化之後再進行一次HPLC純化以進一步提高純度，尤其適合長度高於59個堿基且帶有修飾的引物 |
按應用來選擇純化方式
| 應用 | 純化方式 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| HAP | PAGE | ULTRAPAGE | HPLC | HPLC_CE IE-HPLC 2X HPLC PAGE+HPLC |
|
| 普通PCR/多重PCR/逆轉錄PCR（RT-PCR） | √ | √ | √ | √ | √ |
| 熒光定量PCR（qPCR）/數字PCR（dPCR） | √ | √ | √ | √ | √ |
| 一代測序（Sanger） | √ | √ | √ | √ | √ |
| 高通量測序（NGS） | √ | √ | √ | √ | √ |
| 全基因合成 | √ | √ | √ | √ | √ |
| 亞克隆/點突變 | √ | √ | √ | √ | |
| 基因構建/RNA幹擾 | √ | √ | √ | √ | |
| PCR產物用於克隆表達研究或基因重組等 | √ | √ | √ | ||
| 反義核酸 | √ | √ | |||
| 修飾或標記引物 | √ | √ | |||
| 化學及物理應用 | √ | √ | |||
| 體外診斷應用 | √ | ||||
綜合價格、引物長度、修飾等因素選擇純化方式
| 純化方式 | 價格 | 純度 | 引物長度（mer） | 帶修飾 | 其他 | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 短片段 (~10) |
中片段 (11~59) |
長片段 (60~130) |
超長片段 （131~）1 |
|||||
| HAP | 最低 | 較高 | 不適合 | 適合 | 不適合 | 不適合 | 不適合 | |
| PAGE | 低 | 較高 | 不適合 | 適合 | 不適合 | 不適合 | 不適合 | |
| ULTRAPAGE | 適中 | 高 | 不適合 | 推薦 | 適合 | 適合 | 不適合 | |
| HPLC | 適中 | 高 | 推薦 | 推薦 | 適合 | 適合 | 推薦 | |
| HPLC_CE (IVD) | 偏高 | 高 | 不適合 | 推薦 | 不適合 | 不適合 | 推薦 | 降低交叉 汙染率 |
| IE-HPLC | 最高 | 極高 | 不適合 | 推薦 | 推薦3 | 推薦3 | 推薦2 | |
| 2X HPLC | 最高 | 極高 | 不適合 | 推薦 | 推薦3 | 推薦3 | 推薦2 | |
| PAGE+HPLC | 最高 | 極高 | 不適合 | 適合 | 推薦 | 推薦 | 不適合 | |
備注：
1.由於超長片段合成難度較大，我們無法保證其成功率及純度等，如需合成，請提前與技術支持溝通谘詢；
2.某些修飾種類受限製；
3.兼並堿基不適用。