概述

由於酵母對重組表達的蛋白質有真核細胞相似的翻譯後修飾的功能，同時又有培養成本低廉等優點，酵母已成為研究蛋白相互作用和真核基因表達的重要工具。但酵母細胞壁堅硬，傳統的強堿法提取蛋白，使得大多數蛋白發生變性；而玻璃珠法提取蛋白會使得玻璃珠對蛋白產生一定的非特異性吸附作用，導致蛋白質的損失。該一步法酵母活性蛋白提取試劑盒采用一種溫和的非離子型去汙試劑，可在20 min內從酵母細胞中提取可溶性蛋白，而且絕大對數蛋白可以保持活性。通過對畢赤酵母的可溶性蛋白提取表明，該方法提取效率要高於傳統的玻璃珠法。本試劑盒可以使用20次。

特點

• 不需要劇烈地機械磨碎和長時間的破壁酶消化，比較適合於酵母胞內重組蛋白的快速篩選； 可以從20 × 50 mg濕重的新鮮或凍存酵母中提取所需要的可溶性蛋白質，而且絕大多數蛋白可以保持活性； 提取的蛋白質可以透析去除離子和去汙試劑，或將緩衝液替換為所需要的合適緩衝液； 該試劑盒所用提取液也可以用於大腸杆菌等革蘭氏陰性細菌中可溶性蛋白質的提取； 可以在20 min內完成整個實驗過程。

應用

提取的蛋白質通過透析換液後可以適用於GST，His標簽蛋白的親和純化。也可用於蛋白活性測定。

組份

提取試劑，蛋白酶抑製劑， DTT ，PMSF