概述

ECL超敏化學發光試劑盒用於檢測辣根過氧化物酶（HRP）標記的蛋白檢測。在過氧化氫的存在下，辣根過氧化物酶催化發光液中的底物氧化並發光，此光可經X光-膠片感光記錄下來。

特點

• 操作方便，使用前將溶液A和溶液B混合即可。
• 靈敏度高。
• 穩定性好。

應用

Western Blot

使用說明

1. 進行Western Blotting實驗，常規電泳、轉膜、孵育一抗，HRP標記二抗，洗膜，以下操作可在室溫下進行。 2. 新鮮配製發光工作液，將溶液A和溶液B按1000:3比例混合，例如1 ml溶液A與3 μl溶液B混合即成工作液。每1 cm2膜隻需要0.05 ml發光工作液。 3. 將漂洗過的膜用吸水紙除去膜上多餘的洗滌液，但不要使膜完全幹燥，並將其轉移至清潔的塑料小盒子中，蛋白麵朝上，用槍頭將配製好的發光工作液均勻的塗抹在膜的表麵，室溫孵育1~2分鍾。 4. 孵育後用鑷子將膜取出，用吸水紙除去膜上多餘的發光液，切勿使膜完全幹燥，隨即將膜的兩麵完全包裹於潔淨的保鮮膜內，避免產生氣泡和褶皺，蛋白麵朝上固定於X膠片暗盒中。 5. 暗房中進行曝光，可在暗房內放置紅燈，先預曝光1 min，根據顯影效果控製顯影時間，定影1 min。根據預曝光效果確定曝光時間，以便得到較好的曝光圖片。 6. 曝光後將定影的膠片取出，在自來水中輕輕漂洗，晾幹後掃描圖片，以便保存。

組份

溶液A，溶液B