概述

該ELISA通用試劑盒主要用於HRP標記抗原抗體對的檢測。

特點

• 1. 操作簡便：無需太多準備，拿到試劑盒既能開展試驗。 2. 應用廣泛：適用於多種靶蛋白的抗原抗體對ELISA檢測。

使用說明

1. 包被：用包被緩衝液將抗原稀釋至1 μg/mL, 按100 μL/孔加入酶標板，即每孔蛋白包被量建議為0.1 μg，多肽包被量建議為1 μg，37 °C孵育1.5小時左右。 2. 洗板：棄去孔內液體，在濾紙上輕輕扣打以吸去殘留液體，每孔加入300 μL洗滌緩衝液（1×）浸泡5分鍾，清洗3次。 3. 封閉：每孔加入200 μL封閉緩衝液，37 °C孵育1.5小時左右。 4. 洗板：棄去孔內液體，在濾紙上輕輕扣打以吸去殘留液體，每孔加入300 μL洗滌緩衝液（1×）浸泡5分鍾，清洗2次。
5. 孵育HRP標記抗體：用抗體稀釋液稀釋抗體。每孔加入100 μL新稀釋後的酶標抗體（可梯度稀釋），37 °C孵肓1小時。同時可設置空白孔、陰性對照孔和陽性對照孔，空白孔加入100 μL抗體稀釋液替代酶標抗體，陰性對照孔可加入100 μL與抗體同種屬IgG，陽性對照孔可加入100 μL確定能與抗原結合的酶標抗體。
6. 洗板：棄去孔內液體，在濾紙上輕輕扣打以吸去殘留液體，每孔加入300 μL洗滌緩衝液（1×）浸泡5分鍾，清洗3次。
7. 顯色：根據使用量將顯色液A和顯色液B按1：1混勻，每孔加入100 μL混勻後顯色液，室溫避光反應5-10分鍾。
8. 終止顯色：每孔加入100 μL終止液。即刻用酶標儀450 nm波長下測量OD值（5 min內）。
9. 結果判斷：一般檢測孔的OD值大於陰性孔OD值的2.5倍，則判定為陽性。

組份

酶標板， 包被緩衝液， 濃縮洗滌液（10×）， 脫脂奶粉， 顯色液A， 顯色液B， 終止液