Southern Blot印跡雜交
服務簡介
Southern 印跡雜交(Southern blot)是進行DNA 特定序列定位的通用方法。1975 年由英國人Southern 創建,是研究DNA 圖譜的基本技術。其基本原理是:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下,可按堿基互補的原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。結合凝膠電泳和核酸內切限製酶分析的結果,便可繪製出DNA 分子的限製圖譜。Southern 印跡雜交一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限製性內切酶消化的DNA 片段,將膠上的DNA 變性並在原位將單鏈DNA 片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經幹烤或者紫外線照射固定,再與相對應結構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。
主要流程
訂購信息
服務項目 | 服務內容 | 周期 |
基因組DNA提取 | 獲得高純50 μg基因組DNA | 1周 |
DNA探針設計合成 | 引物設計、合成及驗證 | 1-2周 |
DIG探針標記 | 標記一條探針 | 2個工作日 |
Southern Blot檢測 | 雜交一張膜,每張膜(1-8個樣品) | 3-4周 |
重複雜交 | 標記一條探針,雜交已有的膜。 | 1-2周 |
客戶提供
提供信息
待雜交目標基因序列和引物序列(公司可以提供引物設計擴增,費用另計)。
請注明酶切方案,如果項目中需要用到非常規的限製性內切酶,需額外加收酶切費用或有客戶提供相應的限製性內切酶。
提供樣品
客戶提供的樣品必須幹冰或帶冰袋運送。
如提供DNA 樣品必須要達到以下條件:
DNA 完整性好,無降解或RNA 汙染,客戶需提供電泳圖;
DNA 純度高,客戶需提供分光光度檢測OD260/OD280 在1.8 左右;
勿用TE 溶解DNA,DNA 濃度不低於0.8 μg/μl,雜交需模板DNA 約20 μg/泳道/次;
長途運輸至乙方,可將檢測合格的DNA溶液編號密封,注意切勿泄漏,低溫快遞。
交付
交付成品
剩餘模板和引物
交付報告
實驗報告(詳細操作步驟,膠片,膠片分析等)