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微生物基因組改造

服務簡介

必威betway官方网站登录 采用經典的自殺質粒方法和高效率的噬s菌體Red 重組係統,經過多年的技術和資源積累,微生物基因組改造是通過打斷、缺失或替換基因組上目的基因,達到研究和利用基因功能和性狀的目的,已成功地在以下種類的微生物中實現了基因改造:大腸杆菌(實驗室菌株和野生菌株)、沙門氏菌、奇異變形杆菌、阪崎腸杆菌、陰溝腸杆菌、葡萄球菌、鏈球菌、乳酸菌、假單胞菌等。

技術支持

Tel:021-57072092
Email: service6@sangon.com

基本流程

自殺質粒方法:

構建攜帶打靶片段和抗性篩選標記的重組自殺質粒
通過接合或電轉化目標微生物中(因為質粒本身無法複製,僅有完整質粒整合到基因組上的克隆才能存活並形成克隆)
大量單克隆篩選
獲得目標基因的正確改造菌株

Red 重組係統:

構建打靶序列(可以采用經PCR擴增獲得的線性DNA)
與表達Lambda噬菌體三種Red重組酶(Bet,Exo和Gam)的質粒共轉染目標菌
在阿拉伯糖的誘導下構建菌體內臨時性的Red重組係統利(用該係統極其高效的同源重組效率,是大腸杆菌RecA重組係統的10倍)
大量單克隆篩選
獲得目標基因的正確改造菌株

訂購信息

服務項目 服務內容 周期
微生物基因改造 包括插入抗性基因打斷目的基因、插入抗性基因缺失目的基因、目的基因插入或替換原有基因和改造菌株的無痕處理 1-3月

客戶提供

提供樣品
帶有單菌落的平板、斜麵或甘油菌保。
提供信息
客戶需要提供詳細的菌株基因型、抗性情況或ATCC NO.等情況;細菌生活所必需的基因一般無法進行改造,客戶實驗前需要確認目的基因是否會影響大腸杆菌的正常生長,若由於目的基因為細菌生長必需基因使實驗失敗所造成的一切損失由客戶承擔。

交付

交付成品

經過改造後的菌種的穿刺菌保、引物等。

交付成品

實驗報告 (包括PCR 產物照片、測序結果等)、測序彩色波形圖、測序方向圖、堿基序列圖、電子版結果。

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