免疫共沉澱

服務簡介

免疫共沉澱(Co-immunoprecipitation，Co-IP)技術是檢測蛋白質間相互作用的經典方法, 其基本原理是以細胞內源性靶蛋白為誘餌，將靶蛋白抗體與細胞總蛋白進行共孵育，促進免疫複合物的形成；隨後加入能夠與抗體Fc段結合的protein A/G (預先結合固化在瓊脂糖小珠上)，形成“結合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗體-proteinA/G小珠”複合物，純化該複合物後凝膠電泳分離蛋白，應用Western blot 或者質譜技術鑒定靶蛋白的結合蛋白。 與其它研究方法相比，免疫共沉澱的優勢在於該體係是在生理條件下檢測蛋白質之間的相互作用，因此，不僅可以檢測到體內形成的天然複合體，而且可排除過表達靶蛋白所帶來的假陽性。其次內源性的靶蛋白質是完全加工、修飾和成熟的蛋白質，因此，依賴於修飾的蛋白質相互作用也能被檢測到 。