DNA測序樣品要求
各類樣品模板均應提供相應的模板和引物信息,並清楚地填寫《必威betway官方网站登录 測序訂單》
模板 | 要求 |
未純化PCR產物 | 片段大於200 bp; |
提供 30 μl以上的PCR擴增產物(濃度大於100ng/μl); | |
取3 μl樣品,能夠清晰的檢測出目的條帶; | |
自帶引物。 | |
已純化PCR產物 | PCR產物溶於雙蒸水中(請勿溶解在TE溶液中); |
濃度大於100 ng/μl,體積大於20 μl,長片段需適當增加提供量; | |
電泳檢測條帶單一明亮; | |
自帶引物。 | |
質粒 |
需提供20 μl以上質粒,濃度大於100ng/μl,質粒溶於雙蒸水中(請勿溶解在TE溶液中); |
建議用相關試劑盒提取質粒; | |
如有可能,同時提供200μl含有相應質粒的菌液備用; | |
需注明載體全稱和插入目的片段長度及測序要求。 | |
菌樣 | 說明載體、抗性類型;我們提供氨苄青黴素和卡那黴素兩種抗生素;其餘類型抗生素需自備並附使用說明; |
應為高拷貝質粒,對於低拷貝質粒,請直接提供約1 μg純化質粒; | |
提供200 μl以上過夜培養(12 h)的新鮮菌液,於EP管中封口保存,防止交叉汙染或滲漏; | |
大量樣品測序,建議在一次性塑料培養皿固體培養基上穿刺培養; | |
建議盡量提供穿刺培養或斜麵培養的菌種(裝在EP管中)。 | |
自帶引物 | 濃度不低於10 pmol/μl(即10 μmol/L),體積10 μl以上,並請注明濃度; |
隨機引物(RAPD引物)、簡並引物、長度不足15 bp或大於30 bp引物、有特殊標記的引物或不純的引物均不能用於測序; | |
盡可能提供引物全序列、PCR退火溫度等信息,以供參考。 | |
免費提供的通用引物 | M13+[即M13-47], M13-[即M13-48], M13(-20), M13(-26), T7promoter, T7 terminator, SP6, T3, BGH, |
5'/3'AOX, α-factor, -96gⅢ, pBV220+/-, pEGFP-N5'/3', pEGFP-C5',3', pCMV5-F/R, pQE30+/-, 5'/3'AD, |
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pGEX5'/3', pGL3+/-, 27F, 1492R, CMV, U6promoter, S-Tag等通用引物。 | |
如您需要的引物不在此列,請電話谘詢或自帶引物,如需生工合成,請注明。 |
溫馨提示
1.對於穿刺培養菌、以及抽幹的質粒可以采用常溫運輸。
2. 對於甘油菌、溶解保存的質粒、PCR已純化和未純化產物建議冷藏運輸。