基因調取
服務簡介
基因調取服務可針對兩種不同的情況。其一是已知序列基因,原核生物基因沒有內含子,可直接提取基因組DNA 進行PCR 擴增,TA 克隆測序;真核生物基因有內含子,需要提取總RNA 反轉錄為cDNA,設計特殊引物進行PCR擴增,再進行TA 克隆測序。其二是未知或已知部分序列基因,則需要使用RACE 技術,即cDNA 末端快速擴增技術。
主要流程
RACE
RNA提取與質檢
特異性引物或通用引物反轉錄
外側引物PCR
內側引物PCR
測序或克隆測序
序列分析
實驗報告
基因步移TAIL-PCR法
DNA提取與質檢
根據已知DNA序列分別設計三條特異性引物和獨特設計的退火溫度較低的兼並引物(可以設計多條,AP1、AP2、AP3……)
3輪PCR
PCR產物測序
序列分析
實驗報告
基因步移內切酶法
DNA提取與質檢
酶切
加接頭
接頭引物與根據已知DNA序列和分別設計2-3條特異性引物2-3輪PCR
PCR產物測序
序列分析
實驗報告
訂購信息
服務名稱 | 服務內容 | 周期 |
已知序列基因調取服務 | 總RNA提取(原核生物可直接提取基因組DNA)、反轉錄、PCR擴增、測序或克隆測序 | 2~5周 |
未知基因RACE | 5’ RACE或3’ RACE,包括總RNA提取,反轉錄,測序或克隆測序;也可選擇訂購RACE試劑盒,自行實驗 |
1~2個月 |
基因組步移 | 調取已知基因序列相鄰的未知上遊或下遊序列 | 1~2個月 |
客戶提供
提供樣品
樣本及其信息
提供信息
基因信息或參考序列
交付
交付成品
測序引物
交付報告
實驗報告:引物序列、PCR 產物照片、測序結果、目的基因的比對結果等;
擴增全片段測序報告:測序彩色波形圖、測序方向圖、堿基序列圖。