RNA幹擾
服務簡介
RNA 幹擾(RNA interference, RNAi)技術,是將與內源mRNA 編碼區同源的小片段(19~23 bp)外源雙鏈 RNA(siRNA)導入細胞中,引發細胞中相應mRNA 高效特異性降解,從而導致特定基因表達沉默(knock down)的一種實驗技術。其中通過構建載體表達siRNA 是多種siRNA 製備方法中有可能進行長期基因沉默研究的方法,siRNA 載體可以在細胞內直接轉錄出shRNA,其幹擾效果等同於siRNA,而且能夠解決siRNA 幹擾時間短的缺點。
主要流程
選擇載體
shRNA設計
載體構建
高純質粒提取
qRT-PCR及Western Blot檢測
病毒包裝及侵染細胞
共轉染293T細胞
慢病毒篩選穩轉細胞株及下遊實驗(腺病毒直接用於下遊實驗)
服務價格
服務項目 | 說明 | 周期 |
慢病毒介導siRNA實驗服務 | 分為慢病毒介導的siRNA篩選和有效幹擾穩定細胞係建立兩個項目,包括細胞培養、shRNA載體構建、慢病毒包裝和侵染、QPCR及WB檢測等。 | 7~10周 |
腺病毒介導的siRNA實驗服務 | 包裝幹擾病毒、細胞侵染、QPCR、WB等 | 8~10周 |
脂質體介導的siRNA實驗服務 | 構建脂質體介導載體、轉染細胞、QPCR、WB等 | 6~8周 |
客戶提供
可選樣品
客戶可選擇自己提供載體
提供信息
靶基因名稱、序列或GeneBank ID 及希望插入載體的名稱等
交付
交付報告
實驗報告
包括siRNA 序列、構建載體的測序報告、熒光定量PCR 檢測報告、Western Blot 圖片及全部實驗數據和詳細的實驗步驟。