同位素標記相對和絕對定量（iTRAQ）技術
服務簡介
iTRAQ是目前運用廣泛的一種標記定量蛋白質組技術，通過與氨基酸末端氨基以及賴氨酸殘基的遊離氨基結合，實現對多肽的標記，並通過不同分子量的試劑對不同來源樣品進行標記的方式實現不同樣品間蛋白質組比較的目的。iTRAQ試劑結構由指示基團、中性平衡基團和反應基團三部分組成。不同指示基團及其相對應平衡基團的質量和都相同，而反應基團能與賴氨酸ε氨基和所有肽鏈的氨基末端連接，可標記所有氨基酸。不同標記試劑與來源於不同樣品胰酶消化後的肽段結合，經過色譜分離，並通過一級質譜和二級質譜。平衡基團在二級質譜時發生中性丟失，而報告基團在二級質譜低質量區域產生多個報告離子，其信號強度分別代表該標記樣品的表達量，根據報告離子的峰麵積計算同一蛋白質同一肽段在不同樣品間的比值，從而實現蛋白的相對和絕對定量。
主要流程
蛋白提取
定量
蛋白標記
色譜分離和質譜上機
數據庫檢索及差異表達蛋白篩選
差異表達蛋白進行經典生物信息學分析
技術優點
- 通量高
- 重複性好且定量準確
- 分辨率高
- 數據豐富
- 自動化程度高
訂購信息
| 項目名稱 | 內容 | 服務周期 |
| iTRAQ（TMT） | 蛋白相對絕對定量與生物信息學統計（標記物不同） | 6~8周 |
交付
交付報告
蛋白濃度測定結果；SDS-PAGE預實驗結果；樣品編號對照表；色譜圖；蛋白原始檢索結果文件；蛋白原始質譜數據文件；iTRAQ results；生物信息學分析材料。
部分結果展示
圖1 火山圖 圖2 GO 富集分析概圖
圖3 蛋白相互作用網絡圖 圖4 表達模式聚類熱圖